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本文標題:"電子顯微鏡研究細胞的精細結構的實驗方法簡介"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2014-4-19 17:15:0

    研究細胞的精細結構時,還可采用一種很有用的方法,叫做表面展開法。展開
層附著在銅網上,干燥后再經過金屬鑄影即可供電子顯微鏡研究。例如,用此法可
制備細菌染色體標本。先用溶菌酶把細菌細胞膜消化掉,將得到的原生質體置于蒸
餾水中使之脹破,染色體可呈一條長纖維游離出來并展開在蒸餾水的表面,撈起后
可進一步制成供電子顯微鏡觀察的標本。植物和動物細胞的間期染色體,以及某些
細胞含有的微管,都可采用這個方法制片。

    使用電子顯微鏡時最不方便之處,就是須要制備干燥的超薄切片并須在真空中
進行觀察。超薄切片機的出現使制片的困難大部分得到克服。利用這種切片機可以
切出厚度為0.2 至0.02微米的切片。但是,脫水和除去溶于樣品中的鹽類以及染色
劑的應用,都會改變結構。因此,對電子顯微鏡下觀察到的生物膜、細胞質或其它
有形成份,在解釋和說明時應持慎重態度。盡管有這些困難,但是越來越清楚地看
到,近年來由于用電子顯微鏡研究所做出的貢獻,使我們對細胞的了解達到了一個
嶄新的水平。

    如果某些生物樣品在染色后其結構與背景的反差仍然很弱,這時常采用重金屬
鑄影法來加強反差,甚至可得到三維圖象。將重金屬,特別是金、鉑、鉻置于真空
蒸鍍器中加熱蒸發,使金屬蒸氣斜向地噴濺到樣品上。就像流沙或雪花被風吹到地
面的物體上形成陰陽面一樣,噴濺到樣品上的金屬也可把樣品的輪廓勾劃出來。在
蒸發噴濺時,還可使樣品轉動,從不同方向進行鑄影。

    如果樣品太厚不宜用鑄影法時,還可采用復型法。其法是在真空中用金屬蒸發
法在樣品表面鍍一層厚度達若干纖米的鉑和碳。然后用氫氧化物溶去樣品,漂浮的
復型用銅網撈起,制成供電子顯微鏡觀用的標本。


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