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本文標題:"落射熒光顯微鏡的使用方法-生物細胞圖像分析"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2015-9-9 11:24:20

落射熒光顯微鏡的使用方法-生物細胞圖像分析

在落射熒光照明時(指激發光從物鏡向下照射樣品,用
同個物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡),還需要加
上一個雙色束分離器。激發光源發射的光通過激發濾片投射
到雙色束分離器上,雙色束分離器對短波長的激發光有很強
韻反射能為,但對較長波長的發射熒光卻能通過,因此就使
激發光和熒光分開,透過的殘余激發光被阻斷濾片進一步吸收。  
 
熒光顯微鏡的使用方法
 
    熒光顯微鏡的使用方法:
    1.接通電源后,開動熒光顯微鏡的汞燈啟動裝置,點
燃高壓汞燈,點燃15分鐘后進行觀察。
    2.根據觀察需要選擇一定的激發濾片,使之進入光
路,允許一定波長的光波通過,作為激發光源。
    3.根據激發濾片選擇相應的阻斷濾片進行觀察。
    4.如利用高壓汞燈進行普通顯微鏡觀察和進行顯微鐃
攝影時,必須將吸收熱和紫外線濾片放入光路,并將中性濾
片同時推進光路,減低光強度。
    5.關閉熒光顯微鏡后,如需再次使用,需待關閉電源
20分鐘后再重新啟動,否則造成汞燈霧化,縮短使用壽命。
 
實驗步驟
    1.用矛簽刮下口腔粘膜上皮細胞涂于載片。
    2.于涂有細胞的載片上滴一滴熒光染液。
    3.加蓋片,注意防止氣泡發生。用少量指甲油把蓋片
邊緣封好,待指甲油干后,即可在熒光顯微鏡下觀察。
    4.把用于紫外光的激發濾片、雙色束分離器/內裝阻
斷濾片的組合塊置于光路。用40倍或100倍熒光油浸物鏡可
觀察細胞核記錄細胞核發射何種顏色的熒光。
    5.再換入紫或藍光的組合塊,觀察線粒體并記錄發何
種顏色的熒光,特別注意線粒體呈何種形狀。

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