本文標(biāo)題："熒光顯微鏡用灰階 CCD 感應(yīng)不同亮度而取得影像"
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在組織工程的領(lǐng)域，希望達到快速組織重建與增生，一般利用生物
統(tǒng)計的方式作為評估，紀錄改變變因前與改變變因后細胞的數(shù)目或分佈
情形，可以得到一個大方向的變化，例如由細胞的生長週期統(tǒng)計，也許
可以比較出何種材料適合細胞貼附，然而對于欲研究的變因，無法得知
在實驗中所產(chǎn)生的影響，更無法做立即性的評估，希望可以藉由細胞生
長的即時影像，產(chǎn)生有用的資訊作為立即性的評估，例如位移、速度等
細胞遷移的資訊，要從影像得到這些資訊，影像處理為目前已知的方
式，可能需透過電腦複雜性的運算，對于運算上時間成本過度消耗，希
望在相類似的影像上找到數(shù)學(xué)特征，達到快速辨識，聚乳酸-甘醇酸
(Poly-lactic-co-glycolic acid、PLGA)最常用來作為培養(yǎng)細胞支支架，然而
聚乳酸-甘醇酸支架本身不透明，需用染色技術(shù)始能看到上面的細胞，本
研究分割細胞染色影像處理，希望未來可以用活細胞染色技術(shù)觀察細胞
運動，加入不同的評估模型，探討組織的增生
本研究比較兩種染色影像，錐藍染色（Typan Blue staining）與免疫
螢光染色（Immunol Fluorence Staining）影像，錐藍染色主要使得細胞
呈現(xiàn)藍色，有別于支架的顏色，必須用彩色 CCD 才可擷取出不同顏色
變化，利用色調(diào)與飽和度的分析，可以找出細胞的分佈，而螢光染色主
要讓細胞與支架呈現(xiàn)不同亮度，用灰階 CCD 感應(yīng)不同亮度而取得影像，
可以簡化影像的複雜度。
免疫螢光染色影像的特性，主要受螢光分佈的影響，在低倍顯微鏡
下，由于解析度有限，所得影像細胞為一團綠光，分割影像容易，在高
倍顯微鏡下，解析度因為放大倍率提高，螢光分佈呈離散的狀態(tài)，在影
像辨識上，利用歸類離散點取得細胞邊界
使用A、B兩種遮罩，分別將免疫螢光染色原始灰階影像強化
后，利用Otsu統(tǒng)計的方法，找到最佳的二值化閥值，因為遮罩對于螢光
分佈疏密所產(chǎn)生的強化效果不同，最后經(jīng)過膨脹和侵蝕將螢光離散點匯
聚成單一區(qū)塊，最后即可找出細胞膜與細胞核的邊界
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