本文標(biāo)題："熒光顯微鏡用灰階 CCD 感應(yīng)不同亮度而取得影像"
發(fā)布者：yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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在組織工程的領(lǐng)域，希望達(dá)到快速組織重建與增生，一般利用生物
統(tǒng)計(jì)的方式作為評(píng)估，紀(jì)錄改變變因前與改變變因后細(xì)胞的數(shù)目或分佈
情形，可以得到一個(gè)大方向的變化，例如由細(xì)胞的生長(zhǎng)週期統(tǒng)計(jì)，也許
可以比較出何種材料適合細(xì)胞貼附，然而對(duì)于欲研究的變因，無(wú)法得知
在實(shí)驗(yàn)中所產(chǎn)生的影響，更無(wú)法做立即性的評(píng)估，希望可以藉由細(xì)胞生
長(zhǎng)的即時(shí)影像，產(chǎn)生有用的資訊作為立即性的評(píng)估，例如位移、速度等
細(xì)胞遷移的資訊，要從影像得到這些資訊，影像處理為目前已知的方
式，可能需透過(guò)電腦複雜性的運(yùn)算，對(duì)于運(yùn)算上時(shí)間成本過(guò)度消耗，希
望在相類(lèi)似的影像上找到數(shù)學(xué)特征，達(dá)到快速辨識(shí)，聚乳酸-甘醇酸
(Poly-lactic-co-glycolic acid、PLGA)最常用來(lái)作為培養(yǎng)細(xì)胞支支架，然而
聚乳酸-甘醇酸支架本身不透明，需用染色技術(shù)始能看到上面的細(xì)胞，本
研究分割細(xì)胞染色影像處理，希望未來(lái)可以用活細(xì)胞染色技術(shù)觀察細(xì)胞
運(yùn)動(dòng)，加入不同的評(píng)估模型，探討組織的增生
本研究比較兩種染色影像，錐藍(lán)染色（Typan Blue staining）與免疫
螢光染色（Immunol Fluorence Staining）影像，錐藍(lán)染色主要使得細(xì)胞
呈現(xiàn)藍(lán)色，有別于支架的顏色，必須用彩色 CCD 才可擷取出不同顏色
變化，利用色調(diào)與飽和度的分析，可以找出細(xì)胞的分佈，而螢光染色主
要讓細(xì)胞與支架呈現(xiàn)不同亮度，用灰階 CCD 感應(yīng)不同亮度而取得影像，
可以簡(jiǎn)化影像的複雜度。
免疫螢光染色影像的特性，主要受螢光分佈的影響，在低倍顯微鏡
下，由于解析度有限，所得影像細(xì)胞為一團(tuán)綠光，分割影像容易，在高
倍顯微鏡下，解析度因?yàn)榉糯蟊堵侍岣撸灩夥謥殉孰x散的狀態(tài)，在影
像辨識(shí)上，利用歸類(lèi)離散點(diǎn)取得細(xì)胞邊界
使用A、B兩種遮罩，分別將免疫螢光染色原始灰階影像強(qiáng)化
后，利用Otsu統(tǒng)計(jì)的方法，找到最佳的二值化閥值，因?yàn)檎谡謱?duì)于螢光
分佈疏密所產(chǎn)生的強(qiáng)化效果不同，最后經(jīng)過(guò)膨脹和侵蝕將螢光離散點(diǎn)匯
聚成單一區(qū)塊，最后即可找出細(xì)胞膜與細(xì)胞核的邊界
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