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傳統的光學顯微鏡是什么樣子的?

新聞來源:未知 發布時間:2011/12/30 16:51:45
傳統的光學顯微鏡使用的實際上是場光源,由于光散射,在所觀察的視野內,樣品上的每一點都同時被照射并成像,入射光照射到整個細胞的一定厚度,位于焦平面外地反射光也可以通過物鏡而成像,使圖像的信噪比降低,影響了圖像的清晰度和分辨率。

此外,傳統的額光學金相顯微鏡也只能對局部作平面成像,而LSCM脫離了這種模式,采用激光束做光源,激光束經照明針孔,經由分光鏡反射至物鏡,并聚焦于樣品上,對標本內焦平面上每一點進行掃描。

然后,激發出得熒光經原來入射光路直接反向回到分光鏡,通過探測針孔時先聚焦,聚焦后的光被光電倍增管探測收集,并將信號輸送到計算機,在彩色顯示器上顯示圖像。

在這個光路中,只有焦平面啥樣的光才能穿過探測針孔,焦平面以外區域射來的光線在探測小孔平面是離焦的,不能通過小孔。因此,非觀察點的北京呈黑色,反差增加,成像清晰。由于照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點不會再探測針孔處成像,即共聚焦。以激光做光源并對樣品進行掃描,在此過程中兩次聚焦故成為激光共聚焦金相顯微鏡。

現代的共聚焦顯微鏡,圖像可通過PMT輸出產生,也克用數字式電荷耦合器件的相機捕獲,并可直接用計算機圖像系統進行處理,在高分辨率視頻顯示器呈現,同時可將所有數據儲存在硬盤中。
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