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本文標題:"用光學顯微鏡可對蛋白質定位細胞形狀研究顯微鏡"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2015-12-3 15:26:22

用光學顯微鏡可對蛋白質定位細胞形狀研究顯微鏡

 
細胞形狀的每時每刻維持也依賴于細胞骨架成分的裝配。
現有兩種實驗方法可用于檢測間期細胞骨架的裝配,但
這兩種方法都有某些局限性。一種方法是微注射可在體外裝
配的熒光標記蛋白,用光學顯微鏡可對蛋白質定位;某
些動力學特征可用光漂白測定。以這種方式觀察到的結構幾
乎總是可信的,即其結果與免疫熒光所見相符合。微注射方
法有某些限制性,它們只能用于識別與溶相交換的結構組分,
 
但是不能檢出在數小時內不發生交換的極為穩定的組分。它
們不能鑒別裝配和交換。注射后立刻彌散的方式變成為分離
定位的方式。這是與裝配成進行交換的結構或與有限數目結
合部位的連接一樣都是相一致的。動力學可能起指令作用。
業已發現a肌動蛋白和vinculin與粘附斑緊密地結合,但這
需要數小時,而它們所連接的結構的形成和溶解只需數分鐘。
這表明,雖然蛋白質密切地結合,但它們進入這些結構的通路
不是細胞內的主要途徑。這些研究的另一個局限性是熒光會
使結構擴大。這些研究的要點是:(1)用此方法觀察到的裝
配通常是可靠的;(2)動力學上能與結構本身的形態區別;(3)
 
在某些情況下,它是細胞特異的;(4)微管蛋白裝配的方向
與遠側快裝配端是一致的;(5)用這種技術在任何細胞中檢出
的最活動種類肌動蛋白比肌動蛋白單體大,提示細胞內只有
極少量的肌動蛋白是游離G肌動蛋白,這些緩慢移行的
復合物可能是肌動蛋白低聚物。或是與肌動蛋白特異蛋白相
連接的肌動蛋白。 

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