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本文標題:"脂多糖類物質細胞分析圖像顯微鏡"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2016-12-22 1:7:52

 脂多糖類物質細胞分析圖像顯微鏡

 
大量外源蛋白質的生產可能觸發熱休克反應。熱休克調節子的響應
將增加蛋白水解活性。在一些情況下,胞內蛋白水解活性導致產品
降解速率等于其生產速率。
 
    更易發生的是:目標蛋白形成包含體。雖然外源蛋白是包含體
中的主要成分,但通常包含體中也包含一些其他細胞物質。包含體
中的蛋白質發生了錯誤折疊。錯誤折疊的蛋白質是沒有生物活性的
,也是毫無價值的。如果從培養液中回收包含體,包含體能被重新
溶解并恢復活性(價值)。如果重溶過程很簡單,而且恢復率非常高
,則包含體的形成就是有利的。因為它簡化了回收和純化的起始步
驟。在重溶過程中,用幾種分析方法來檢查蛋白質以確保沒有發生
化學修飾作用是很重要的。即使一個側鏈基團中的輕微變化也會改
變產品的效用。
 
    生產胞質蛋白質(即非分泌性蛋白)也會產生一些其他非常嚴重
的后果。大腸桿菌中的胞內環境可能不利于二硫鍵的形成。在大腸
桿菌中,這些蛋白質(外源的)的第一個氨基酸通常是甲硫氨酸,而
在這些蛋白質的固有宿主細胞中,經過正常的翻譯后加工,它們的
第一個甲硫氨酸被切掉。如果產物被保留在細胞內,在回收時就必
須裂解(破碎)細胞。細胞裂解通常導致大腸桿菌中內毒素(或熱原
質)的釋放。內毒素是脂多糖類物質(在外膜中),它能導致不希望
發生的副作用(例如高燒),并造成病人死亡。因此,產品純化就是
一個非常重要的考慮因素。
 
    可通過蛋白質分泌和排泄(secretion and excretion)來避免
大腸桿菌的上述許多限制。在這里分泌被定義為蛋白質穿過大腸桿
菌內膜(到達細胞周質)的運輸過程。排泄被定義為蛋白質(從細胞
周質)釋放到胞外的過程。
    大腸桿菌中約有20%的總蛋白被運輸穿過內膜而進入細胞周質
空間,或者摻入外膜中。

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