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本文標(biāo)題:"顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定染色率"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò)-----時(shí)間:2015-9-10 16:47:50

顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定染色率

 
染色率的測(cè)定
 
    活的細(xì)胞因新陳代謝不停地進(jìn)行,所以細(xì)胞內(nèi)氧化還原
值(rH)頗小,還原力強(qiáng),對(duì)無(wú)毒染料能還原脫色;而死細(xì)胞
及代謝緩慢的老細(xì)胞,無(wú)此還原力。次甲基藍(lán)(美藍(lán))無(wú)毒,
能被活細(xì)胞還原為無(wú)色,故用以區(qū)別細(xì)胞的死活,以染色率
表示之。
 
    用上述觀察酵母形態(tài)的檢片,在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定
染色率。計(jì)算時(shí)一般取3~5個(gè)視野的平均數(shù)。
酒母醪常易為各種細(xì)菌所污染。細(xì)菌個(gè)體小,消光率
小,在顯微鏡下不易明顯觀察,且細(xì)菌種類繁多,在工廠生
產(chǎn)條件下,檢查和鑒別是一件相當(dāng)復(fù)雜和困難的事。在生產(chǎn)
中可采用一般的染色方法粗略地加以檢定。
    (1)試劑
    ①齊氏石炭酸復(fù)紅染色液(試劑120)  
    ②香柏油   
    ③二甲苯    
    (2)測(cè)定步驟
    ①檢片的制備取浸泡于酒精中的干凈的載玻片一塊,
在酒精燈上燒去殘酒(不要用布或紙抹)后,涂試樣一小滴
于載玻片中央,在火焰上通過(guò)2~3次,使涂片上的菌體貼
牢于載片上,以免染色洗滌時(shí)脫落(通過(guò)火焰固定涂片時(shí),
要注意掌握通過(guò)火焰的速度和溫度,過(guò)快不易固定,過(guò)慢則
因溫度過(guò)高,細(xì)胞易變形。蛋白質(zhì)在70℃以上就能凝固,
固定于載片上)。
載片固定后,滴數(shù)滴齊氏石炭酸復(fù)紅染色液于涂片上,
稍加熱,靜置1分鐘。染色時(shí)間一到,即用自來(lái)水沖洗,將
涂片上的染色液洗去(注意!水要沖在涂面旁邊,不要對(duì)準(zhǔn)
涂面沖),而后用吸水紙吸千,稍停片刻,即可鏡檢。
    ②鏡檢方法將載片置于顯微鏡下,用油鏡觀察。先
數(shù)酵母總數(shù),再數(shù)同一視野內(nèi)被復(fù)紅染色之桿菌等的細(xì)胞
數(shù),鏡檢3-5個(gè)視野,計(jì)算雜菌率。
酵母細(xì)胞數(shù)的測(cè)定
    酵母細(xì)胞數(shù)是成熟酒母醪的一項(xiàng)主要控制指標(biāo),是衡量
酒母質(zhì)量、控制工藝操作的重要根據(jù)。因此,必須熟練地掌
握酵母細(xì)胞數(shù)的測(cè)定方法,及時(shí)地滿足生產(chǎn)的需要。
所用儀器和試劑
    血球計(jì)測(cè)定酵母細(xì)胞數(shù)通常應(yīng)用血球計(jì)。血球計(jì)
為一塊具有H形溝槽的厚玻片

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